色谱柱受到污染该的应对方法

色谱柱受到污染该的应对方法

色谱柱在日常运用过程中，虽然维护严格，样品和活动相虽然经过前处理，但经过长时间的运用，依然难以完全避免柱子受到污染，固定相丢失、板结、柱床陷落以及柱效下降等。有些能够经过维修，使部分柱效康复。

1.柱污染再生技术　

色谱柱污染后，能够用适宜的溶剂冲刷，使柱效再生。C18柱惯例的再生洗涤办法是：分别用甲醇、三氯甲烷、甲醇/水各60 mL顺次经过色谱柱，再用100%甲醇60 mL平衡色谱柱后封存，柱效将康复正常。必要时，根据柱污染性质(如有机污染、盐类污染等)，选用0.05 mol/L H2SO4、0.5 mol/L H3PO4或0.1 mol/L EDTA钠盐冲刷，然后再用水冲刷，后用100%甲醇平衡色谱柱后封存。关于严峻污染的C18柱，可选用水、甲醇、氯仿、乙烷顺次冲刷后，按顺序倒过来再冲刷1次，每次所用溶剂60 mL，不接检测器，后用100%甲醇平衡色谱柱封存。

2.柱污染的修正　

在柱污染再生无效或已知柱污染严峻时，能够选用柱修补的办法解决，但柱污染深度不宜超过5 mm。办法是将特制小铲将污染部分挖去，再用与柱填料相同的固定相与活动相混合制成浆状，然后将浆状固定相细心补入被挖去的部分(尽量使后添补的固定相挨近原装的紧密程度)，修平端面即可。修好的柱子如果柱头两头的筛板的孔径是共同的，可将柱子倒置过来运用一般时间，意图是借助活动相冲刷作用，康复柱床紧密程度。

3.柱陷落的修正　

柱陷落的原因很多。关于陷落不太严峻时，如果柱头两头的筛板孔径是共同的，可将柱倒置运用一般时间，即可康复性能。当陷落严峻(5 mm左右)时，可选用柱污染的修正办法修补即可。